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Examinando (FBIOyF) Producción de Grado por Autor "Banchio, Claudia"
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Ítem Embargo Análisis del comportamiento de células madre neurales en un ambiente oxidativo e inflamatorio(2018) Perez, Consuelo; Banchio, ClaudiaLas células madre son células indiferenciadas que tienen la capacidad de autorrenovarse y dar origen a los distintos tipos celulares que componen un organismo. Particularmente, las células madre neurales (NSCs) son células multipotentes que tienen la capacidad de generar neuronas o células de la glía y residen en el cerebro de mamíferos. Ante un daño en el sistema nervioso central (SNC), las NSCs pueden migrar al sitio de la lesión para reparar el tejido dañado y pueden diferenciarse a neuronas maduras. A pesar de la presencia de estas células, su potencial para reemplazar neuronas muertas y reconstruir las conexiones dendríticas luego de una lesión es limitado, debido a la presencia de factores inflamatorios y a la generación de un microambiente oxidativo, que afectan su supervivencia. En el presente trabajo de Tesina evaluamos los efectos que mediadores oxidativos y pro- inflamatorios ejercen sobre la funcionalidad de las NSCs. Demostramos que alteraciones en los niveles intracelulares de los metales de transición hierro y cobre afectan la viabilidad de las NSCs en condiciones de diferenciación y de proliferación. De manera similar, factores pro-inflamatorios derivados de macrófagos activados redujeron el número de células viables en cultivos de NSCs en condiciones de diferenciación. Asimismo, demostramos que estímulos como el daño oxidativo y factores pro-inflamatorios son capaces de promover en distinto grado la neurogénesis de las NSCs y afectar la diferenciación hacia el linaje astroglial. En conjunto, estos resultados aportan evidencia que respalda la idea de que el microambiente de la lesión en el SNC puede afectar la supervivencia y diferenciación de las NSCs.Ítem Acceso Abierto Criopreservación de células madre neurales embrionarias (CMNEs) mediante la metodología de enfriamiento lento(Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas., 2018-02-19) Berca, Catalina; Robert, María Celeste; Montaner, Aneley Natalia; Banchio, ClaudiaDebido al gran auge en el uso de células madre neurales para terapias regenerativas, es de fundamental importancia contar con métodos de preservación y almacenamiento seguro de las mismas. Uno de los métodos comúnmente usados es la criopreservación mediante enfriamiento lento; sin embargo, no existe al presente un protocolo definido para el mismo. A partir de esto se propone como objetivo del presente trabajo el desarrollo de un protocolo de criopreservación de CMNEs. Para ello, se requiere controlar e investigar las variables asociadas al daño celular durante el proceso de enfriamiento lento de las células en suspensión, de manera de sentar las bases del mismo. Así, partiendo de parámetros pre-establecidos en nuestro laboratorio mediante estudios de penetración del DMSO para la determinación del tiempo y temperatura óptimos de incubación de dicho ACP con las CMNEs, se evaluaron distintas condiciones para la criopreservación de las mismas. Específicamente, se analizaron distintas velocidades de enfriamiento, así como el efecto de las mismas y del tiempo de almacenamiento sobre determinadas propiedades celulares como ser tamaño, morfología, capacidad de proliferación y potencial de diferenciación. Luego del análisis exhaustivo de los parámetros analizados, se procedió a seleccionar aquella metodología que evidenciara mejor preservación de las CMNEs.Ítem Embargo Criopreservación de Células Madre Neuronales Embrionarias (CMNEs) mediante la metodología de enfriamiento lento(2021) Faraco, Irina; Robert, María Celeste; Banchio, ClaudiaLa habilidad de las células madre para actuar como fuente de nuevas células diferenciadas y de regenerar tejidos, las hacen una herramienta prometedora para las terapias regenerativas con la intención de restaurar los daños producidos por una lesión aguda o enfermedad crónica. Las células madre neurales (CMNs) son una promesa para las terapias de reparación y regeneración debido a su ubicación única dentro del Sistema Nervioso Central (SNC), a su potencial para proliferar y diferenciarse en todas las principales líneas neuronales, y a su habilidad para incorporarse funcionalmente dentro de circuitos neuronales preexistentes. Uno de los métodos más utilizados para la preservación de dichas células es la criopreservación por enfriamiento lento. Es necesario destacar que en los estudios publicados, se ha realizado una escasa investigación sistemática sobre las variables criobiológicas asociadas con el daño producido por el enfriamiento lento. Se destaca la falta de estudios sistemáticos relacionados con variables como la velocidad de enfriamiento, concentración y tipo del agente crioprotector (ACP), los efectos osmóticos asociados a la introducción y remoción del ACP, la temperatura y la velocidad a la cual se realiza este procedimiento, entre otros, faltantes que dieron la base del desarrollo de esta Tesina. En el presente trabajo se llevaron a cabo diversos estudios con el objeto de contribuir al desarrollo de un protocolo de preservación de células madre neural embrionarias (CMNEs). Para su realización, fue necesario controlar e investigar sistemáticamente las variables asociadas al daño celular que ocurren durante el enfriamiento lento en sistemas donde el material es congelado como una suspensión de células aisladas. Partiendo de parámetros pre- establecidos en nuestro laboratorio, se realizaron estudios a una dada velocidad de enfriamiento con el objetivo de evaluar el efecto de la misma y del tiempo de almacenamiento sobre diversos parámetros celulares como el tamaño, forma y capacidad de proliferación.