Examinando por Autor "Rosso, Silvana Beatriz"
Mostrando 1 - 7 de 7
Resultados por página
Opciones de ordenación
Ítem Embargo Estudio de la vulnerabilidad a cocaína en ratas: implicancias de la vía canónica de Wnt(2022) Funes, Alejandrina; Pacchioni, Alejandra María; Rosso, Silvana BeatrizEl consumo problemático es una enfermedad neuropsiquiátrica caracterizada por la búsqueda y el uso compulsivo de sustancias psicoactivas (SPs), y por el riesgo permanente de reincidencia aun después de largos períodos de abstinencia. La transición entre el uso ocasional de una SP y el consumo problemático, involucra neuroadaptaciones a largo plazo en el circuito cerebral de la recompensa [1][2]. Esta transición podría comenzar con el uso en individuos vulnerables o en individuos en estados particularmente vulnerables del desarrollo como son los adolescentes [3]. El estudio de la vulnerabilidad individual a los efectos de las SPs, involucra la evaluación de factores genéticos y/o ambientales (como la exposición a situaciones de estrés) que generan un individuo vulnerable. La adolescencia es una etapa particularmente vulnerable al efecto de las SPs, que en los roedores se extiende entre el día post natal (DPN) 28 y el 42 [4]. Resultados recientes de nuestro laboratorio revelaron que el aislamiento social (AS) durante 5 días, entre el DPN 30 y el 35, aumenta la vulnerabilidad a los efectos reforzantes y estimulantes de Cocaína medidos en la adultez en ratas Wistar machos [5]. Uno de los objetivos propuestos en este trabajo de tesis, fue evaluar el impacto del estrés durante la adolescencia tanto a nivel conductual como molecular, así como el rol de la neurotransmisión dopaminérgica en este fenómeno. Para ello, utilizamos el mismo esquema experimental que Cuesta y col (2020)[5], y pudimos determinar que el estrés modifica en formas diferentes la respuesta conductual en ratas machos que hembras. Los resultados obtenidos mostraron que luego de 24hs de finalizado el estrés (DPN36), en los machos aislados se muestra una tendencia a disminuir la actividad locomotora total con respecto a aquellos animales que no fueron estresados. Además, se observó que la administración sistémica de Sulpiride (un antagonista dopaminérgico) revertiría ese efecto. Por otro lado, en el DPN45 las hembras estresadas mostraron una disminución con respecto al control en el tiempo de permanencia en el área central indicando que podría haber un aumento en los niveles de ansiedad. Desde hace más de una década, nuestro laboratorio ha centrado sus estudios en las implicancias de la vía canónica de Wnt sobre la vulnerabilidad a los efectos de Cocaína, tanto a nivel molecular como conductual. Los factores Wnt (del inglés, Wingless-related integration site) [6] son glicoproteínas que funcionan como importantes mediadores de la comunicación intercelular y su participación es crucial para el normal desarrollo embrionario, para el desarrollo del sistema nervioso; y recientemente se ha demostrado que también es crucial para el funcionamiento del cerebro adulto [7][8]. En este sentido, fuimos los primeros en demostrar que la vía canónica de Wnt participaba en la sensibilización inducida por Cocaína [9]. Más aún, demostramos que el estrés disminuye la actividad de la vía canónica de Wnt en la corteza prefrontal (CPF) hasta 10 días después de finalizado el tratamiento [5]. En la presente tesis, exponemos resultados que muestran que, esa disminución en CPF así como su reversión por la administración de Sulpiride es un efecto que ocurriría solo en ratas machos. Resultados de nuestro grupo de investigación indicarían que, la vía canónica de Wnt esta inhibida en la CPF únicamente en animales que desarrollan sensibilización a Cocaína [9]; y que, una inyección de LiCl (Cloruro de Litio) previo a la administración de Cocaína, impide tanto el desarrollo como la expresión de la sensibilización [10]. Evaluados en conjunto, el impacto semejante del estrés y del tratamiento repetido de Cocaína sobre la actividad de la vía canónica de Wnt en la CPF podrían sugerir un rol de esta vía en la vulnerabilidad individual a Cocaína. Por otro lado, ha sido demostrado que la vía Wnt/β-catenina está asociada a la síntesis de mielina, y que la cocaína afectaría la síntesis de mielina en el NAcc [11][12][13]. Todos estos antecedentes, nos llevaron a preguntarnos si los cambios que Cocaína produce en la mielinización estarían relacionados con la vía canónica de Wnt y si, además, forman parte de la historia previa de los individuos que dan lugar a la vulnerabilidad. Para empezar a contestar estas preguntas, decidimos utilizar un tratamiento sistémico con LiCl como una estrategia farmacológica que nos permita estudiar si los cambios en mielina inducidos por Cocaína estaban mediados por la vía canónica de Wnt. Para ello, administramos LiCl durante 7 de los 14 días de abstinencia a Cocaína para luego, por un lado, estudiar si revertía la expresión de sensibilización conductual e impedía los cambios moleculares previamente observados en la vía canónica de Wnt, y simultáneamente evaluar la expresión de Proteína Básica de Mielina (MBP). Los resultados de la presente tesis mostraron que el impacto de la administración de LiCl durante la abstinencia sobre la respuesta a Cocaína depende de los cambios que previamente produce el tratamiento con Cocaína en los animales, es decir si ocurre o no el desarrollo de sensibilización. Más aún, observamos que aquellos animales que no desarrollan sensibilización al recibir LiCl exacerban la expresión de la sensibilización; algo que no vimos en los animales tratados con Salina. Mientras que, en la expresión de β-catenina observamos resultados diferenciales de acuerdo al área estudiada y al impacto de Cocaína (tanto en el desarrollo como en la expresión). Por su parte, los niveles de MBP en NAcc presentaron una tendencia a estar aumentados en aquellos animales que recibieron el challenge con Salina y LiCl en la abstinencia con respecto a los que recibieron Salina durante la abstinencia. Este resultado también lo pudimos observar en CPF. Brevemente, en el NAcc la β-catenina se encuentra aumentada en los grupos que recibieron LiCl y que mostraron expresión de la sensibilización con respecto al grupo control. En tanto que, en CPF, son los niveles de β-catenina los que presentan mayores modificaciones. Así, en el grupo que recibe Salina se observan diferencias entre los animales que desarrollan y expresan sensibilización con respecto a aquellos que no lo hacen. En la expresión de MBP en CPF, se puede observar una disminución en el grupo que recibió LiCl y Cocaína, comparado con aquel que recibió Salina y Cocaína. En resumen, las variaciones de MBP y β-catenina podrían estar relacionadas con la vulnerabilidad a Cocaína. Más estudios son necesarios para confirmar esta conclusión. Por último, basados en evidencias previas del laboratorio (Cuesta et al 2017; 2020 [9][5]) así como en los resultados obtenidos en esta tesis sobre el impacto del estrés en la vía canónica de Wnt en CPF de machos, decidimos evaluar si los cambios en la vía de Wnt son suficientes para desarrollar sensibilización a Cocaína. Para ello se realizaron infusiones intra-cerebrales de Sulindac (inhibidor farmacológico de la vía canónica de Wnt [14]) en CPF por 5 días, y luego se aplicó una inyección de cocaína. Los resultados mostraron que la respuesta comportamental a Cocaína es superior en los animales que recibieron Sulindac de los que recibieron Vehículo; resultado que indicaría que la inhibición de la vía Wnt/β-catenina en CPF fue suficiente para inducir sensibilización a cocaína. En resumen, los hallazgos de este trabajo de tesis aportarían evidencias para comenzar a comprender la relación de la vía canónica de Wnt con las neuroadaptaciones y los diferentes mecanismos que median la respuesta a Cocaína. Principalmente, nos permitió comprender la importancia de la vulnerablidad individual como un factor determinante en nuestros resultados, sugiriendo un rol fundamental de las modificaciones de la vía canónica de Wnt en la CPF.Ítem Embargo Evaluación de las vías de señalización Wnt en mamíferos expuestos al herbicida glifosato(2021) Forneris, Paula; Rosso, Silvana Beatriz; Luna, Sebastián AlbertoEl glifosato es el ingrediente activo de las formulaciones comerciales de herbicidas de amplio espectro más utilizadas en nuestro país y alrededor del mundo. Si bien en un principio el glifosato fue considerado como inocuo, no riesgoso para la salud humana, numerosos estudios en modelos animales demuestran sus potenciales efectos tóxicos sobre distintos órganos y sistemas. El sistema nervioso constituye uno de los blancos para el herbicida y los efectos nocivos se manifiestan no solo a nivel estructural sino también sobre el funcionamiento neuronal. En el presente trabajo nos focalizamos en estudiar los efectos de la exposición a glifosato sobre determinados aspectos del funcionamiento del sistema nervioso, así como también la implicancia sobre la vía canónica de Wnt modulada por β-catenina. Para ello, se implementaron pruebas comportamentales tendientes a evaluar la actividad motora, la coordinación y equilibrio de neonatos de ratas expuestos al herbicida. Los resultados obtenidos evidenciaron que el tratamiento con glifosato generó una deficiencia en la coordinación y el equilibrio en ratas jóvenes. Teniendo en cuenta estudios previos, se analizó la expresión de β-catenina, un efector específico de la vía canónica de Wnt, que cumple un papel importante en el desarrollo y funcionamiento del sistema nervioso. Específicamente, se determinó el nivel de β-catenina en corteza prefrontal, estriado dorsal y cerebelo. Los resultados mostraron que la exposición al herbicida induce una disminución en la expresión β-catenina en la corteza prefrontal. Además, estudios en neuronas maduras en cultivo también mostraron alteraciones en la expresión de β-catenina al ser tratadas con glifosato. Estos resultados sugieren que la exposición al glifosato durante el desarrollo induce alteraciones motoras acompañadas de una desregulación de la vía Wnt/β-catenina.Ítem Acceso Abierto Identificación del receptor transmembrana de Wnt7b durante el desarrollo denditrogénico de neuronas piramidales de hipocampo(2013) Cases, Marcos; Rosso, Silvana BeatrizEl crecimiento y la ramificación de las dendritas son episodios críticos en la formación de conexiones neuronales funcionales. Una combinación de factores intrínsecos y ambientales regula la morfología dendrítica de neuronas individuales a través de cambios en el citoesqueleto. Se han identificado varias señales extracelulares y moléculas intracelulares que estimulan o inhiben el crecimiento y la ramificación dendríticas. Estudios en neuronas de hipocampo condujeron al descubrimiento de que la señalización Wnt regula la morfogénesis dendrítica. Wnt7b, que se expresa durante la dendritogénesis en el hipocampo, incrementa el largo y la ramificación de neuronas de hipocampo en cultivo. Con el objeto de progresar en la identificación del/los receptor/es que media/n el efecto dendritogénico del ligando Wnt7b, se investigó la posible participación de la proteína transmembrana Frizzled-7 (Fz7) en tal fenómeno. Para ello, una vez confirmada la presencia de dicha proteína durante el período de interés del desarrollo neuronal, […]Ítem Embargo Neurotoxicidad del glifosato sobre la función sináptica. Implicancias de las vías de señalización Wnt(2022) Luna, Sebastián Alberto; Rosso, Silvana BeatrizEl correcto funcionamiento del cerebro se basa en la precisa conectividad de los circuitos neuronales. Actualmente existen evidencian que demuestran la alta vulnerabilidad del sistema nervioso a contaminantes ambientales. En este sentido, el uso masivo de plaguicidas constituye una amenaza de alto riesgo para la salud humana. Pese al amplio espectro de herbicidas que se encuentran en el mercado, el glifosato se ha convertido en el más utilizado debido a la producción de cultivos genéticamente modificados. Basados en estas evidencias y antecedentes de nuestro laboratorio nos propusimos estudiar los efectos neurotóxicos del glifosato durante estadios avanzados del desarrollo neuronal. Para evaluar la toxicidad inducida por la exposición in vivo al herbicida se trataron ratas durante un período crítico de la maduración del sistema nervioso y sinaptogénesis. Inicialmente, se realizaron pruebas neurocomportamentalesy luego se analizó el nivel de expresión de marcadores sinápticos a través de pruebas bioquímicas. Además, se estudió el efecto del herbicida sobre la formación y maduración de estructuras sinápticas especializadas y marcadores funcionales, por medio de ensayos en neuronas en cultivo y microscopía confocal. Los resultados evidenciaron que las ratas expuestas a glifosato presentaron marcados signos de neurotoxicidad, como déficits en la conducta motora, alteración en los procesos de aprendizaje y memoria y disminución en los niveles de marcadores sinápticos. Por otra parte, los estudios en neuronas en cultivo mostraron disminución en la densidad y maduración de estructuras especializadas del aparato sináptico. Para profundizar en el estudio de las bases moleculares que expliquen estas alteraciones, se examinó si la exposición a glifosato tanto in vivo como in vitro inducía neurotoxicidad a través de cambios en las vías de señalización mediadas por los factores Wnt. Los ensayos bioquímicos realizados mostraron cambios en la vía Wnt/β-catenina en áreas cerebrales relacionadas a los comportamiento estudiados y también estos cambios fueron observados en las células en cultivo, sugiriendo, que estas podrían ser las causas que subyacen los efectos observados. En conclusión estos hallazgos sugieren que la exposición a dosis sub-letales de glifosato afecta la maduración y funcionalidad del sistema nervioso, alterando la vía de señalización Wnt/β-catenina, clave para el correcto desarrollo del sistema nervioso.Ítem Acceso Abierto Role of Wnt/beta-catenin pathway in the nucleus accumbens in long-term cocaine-induced neuroplasticity : a possible novel target for addiction treatment(Wiley, 2016-12-07) Cuesta, Santiago; Batuecas, Jorgelina; Severin, María Julia; Funes, Alejandrina; Rosso, Silvana Beatriz; Pacchioni, Alejandra MaríaÍtem Acceso Abierto WNT signaling in neuronal maturation and synaptogenesis(Frontiers Media, 2013-07-04) Rosso, Silvana Beatriz; Inestrosa, Nibaldo C.The Wnt signaling pathway plays a role in the development of the central nervous system and growing evidence indicates that Wnts also regulates the structure and function of the adult nervous system. Wnt components are key regulators of a variety of developmental processes, including embryonic patterning, cell specification, and cell polarity. In the nervous system, Wnt signaling also regulates the formation and function of neuronal circuits by controlling neuronal differentiation, axon outgrowth and guidance, dendrite development, synaptic function, and neuronal plasticity. Wnt factors can signal through three very well characterized cascades: canonical or β-catenin pathway, planar cell polarity pathway and calcium pathway that control different processes. However, divergent downstream cascades have been identified to control neuronal morphogenesis. In the nervous system, the expression of Wnt proteins is a highly controlled process. In addition, deregulation of Wnt signaling has been associated with neurodegenerative diseases. Here, we will review different aspects of neuronal and dendrite maturation, including spinogenesis and synaptogenesis. Finally, the role of Wnt pathway components on Alzheimer’s disease will be revised.Ítem Acceso Abierto Wnt/beta-catenin pathway in the prefrontal cortex is required for cocaine-induced neuroadaptations(Wiley, 2017-07) Cuesta, Santiago; Severin, María Julia; Batuecas, Jorgelina; Rosso, Silvana Beatriz; Pacchioni, Alejandra María