Browsing by Author "Svetaz, Laura"
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Item Antimicrobial activity of quinoline-based hydroxyimidazolium hybrids(MDPI, 2019-11-28) Insuasty, Daniel; Vidal, Oscar; Bernal, Anthony; Marquez, Edgar; Guzman, Juan; Insuasty, Braulio; Svetaz, Laura; Zacchino, Susana; Puerto, GloriaItem Búsqueda de biofungicidas pos-cosecha a partir de fuentes vegetales autóctonas, aplicables a naranjas, frutillas y duraznos(2021) Di Liberto, Melina G.; Derita, Marcos G.; Svetaz, LauraLas causas de pérdidas de frutas durante la etapa de pos-cosecha son generalmente de orden fisiológico y/o patogénico. Las infecciones fúngicas más comunes y destructivas en naranjas, frutillas y duraznos, son causadas por hongos del género Penicillium, Botrytis cinerea y Monilinia fructicola, respectivamente. Además, Rhizopus stolonifer es un importante patógeno de pos-cosecha capaz de infectar tanto a duraznos como a frutillas, entre otras frutas y verduras. Se emplean habitualmente fungicidas de síntesis química para el control de estos patógenos, pero la exigencia de los mercados internacionales referida al límite de residuos de fungicidas para la importación de frutas, ha llevado a disminuir al máximo el empleo de este tipo de sustancias. El uso de productos naturales, menos nocivos para el ser humano y obtenidos por metodologías sencillas, podría representar una alternativa de manejo fitosanitario tanto en cultivos como en pos-cosecha. Los extractos vegetales han sido reconocidos como agentes antimicrobianos desde la antigüedad y recientemente han aumentado el interés científico para distintos fines terapéuticos tanto en la salud humana, animal o vegetal. Éstos representan una importante fuente de metabolitos secundarios que eventualmente podrían poseer efectos fungicidas. El objetivo de la presente tesis fue estudiar la actividad antifúngica de extractos y aceites esenciales vegetales obtenidos de 27 especies de la flora regional como también de productos naturales obtenidos por síntesis química, contra cinco hongos fitopatógenos responsables de importantes pérdidas económicas en la industria frutícola de la región. Para ello, se determinó el efecto de 58 extractos, 11 aceites esenciales y 54 compuestos de síntesis sobre el crecimiento micelial de los cinco hongos del panel. A través del método de microdilución en caldo, se logró determinar si los productos eran fungistáticos o fungicidas. Al menos un extracto de cada especie vegetal y 39 compuestos de síntesis presentaron actividad fungistática o fungicida contra al menos uno de los hongos del panel. Los cuatro extractos más activos fueron seleccionados para su fraccionamiento bioguiado y aislamiento de los compuestos responsables de la actividad. Se aislaron: poligodial (1) a partir de Persicaria acuminata; 2’,4’-dihidroxi-3’-metoxichalcona (DHMC) (2) y 2’,4’- dihidroxichalcona (DHC) (3) de Zuccagnia punctata; pinostrobina (4) y flavokawina B (5) de Polygonum stelligerum y solidagenona (6) de Solidago chilensis. El extracto acetato de etilo de P. acuminata y los compuestos de síntesis: el derivado N-demetilado del compuesto natural zantosimulina (12) y la metoxima derivada de propiofenona (45) fueron sometidos a ensayos ex vivo en naranjas, frutillas y duraznos, obteniéndose en todos los casos resultados comparables a los fungicidas comerciales. Los ensayos de toxicidad demostraron que el extracto vegetal y el compuesto de síntesis más activo, a las dosis evaluadas, presentaban menor citotoxicidad sobre células hepáticas que el antifúngico comercial carbendazim. Se concluye que los productos naturales evaluados en esta tesis presentan un alto potencial para ser desarrollados como fungicidas de pos-cosecha, destacando la importancia de su menor toxicidad comparada con la de los de uso habitual.Item Desarrollo de fitomedicinas antifúngicas a partir de plantas de la flora argentina(2021) Cordisco, Estefanía; Svetaz, Laura; Sortino, MaximilianoLas infecciones fúngicas han aumentado considerablemente en los últimos años, siendo las ocasionadas por Candida albicans, la principal causa de muerte en individuos inmunocomprometidos. El tratamiento se ve dificultado por el limitado número de drogas antifúngicas en el mercado, cuya eficacia está comprometida por la toxicidad para el hospedero, el estrecho espectro de acción, la emergencia de resistencia y los altos costos. Es por ello que este trabajo se centró en la búsqueda de extractos bioactivos contra C. albicans utilizando nuevas metodologías, como la combinación de extractos naturales con drogas comerciales, con el fin de encontrar actividad antifúngica sinérgica o aditiva; y la irradiación de extractos con luz UV-A, con el fin de excitar moléculas fotoactivas que dañen la levadura mediante estrés oxidativo. Se realizó un screening de 266 extractos obtenidos a partir de 95 especies vegetales argentinas mediante la estrategia clásica (incubación del extracto en solitario con el hongo) y las dos estrategias planteadas anteriormente. Con la estrategia clásica, sólo 28 extractos mostraron actividad en solitario (10,53%). En combinación con antifúngicos comerciales, se obtuvieron 43 extractos activos (16,17%) con al menos uno de los antifúngicos evaluados. Se determinó el tipo de interacción entre 28 extractos activos con itraconazol (ITZ) mediante el método de Tablero de ajedrez, mostrando el 46,43% (13 extractos) interacciones sinérgicas. Se utilizó el programa estadístico Minitab® para evaluar mezclas ternarias manteniendo como componentes comunes, ITZ y un extracto de Zuccagnia punctata, y variando el tercer componente de a uno por vez entre los 12 extractos restantes que habían mostrado sinergismo. Se seleccionaron como mezclas ternarias óptimas aquellas que contenían como tercer componente a los extractos de Ameghinoa patagonica, Scoparia dulcis y Gaillardia megapotamica. Se demostró que las tres mezclas ternarias actuarían por el mecanismo de unión a ergosterol de la membrana fúngica. Mediante la estrategia en combinación con luz, se obtuvieron 31 extractos (11,65%) activos, siendo los extractos hexánico y diclorometánico de raíz de Thymophylla pentachaeta, los más activos. La evaluación de mecanismos fotodinámicos mostró que ambos extractos generan especies reactivas del oxígeno mediante mecanismos tipo I y tipo II. La determinación del espectro de acción evidenció que tanto las mezclas como los extractos fotoactivos poseen actividad contra la mayoría de las especies del género Candida, Cryptococcus neoformans y los dermatofitos ensayados. A través del estudio de la capacidad de inhibición de factores de virulencia fúngicos, se observó que tanto las mezclas como los extractos fotoactivos, disminuyen la adherencia a células epiteliales, la formación de tubo germinativo y pseudomicelio, y la secreción de enzimas hidrolíticas. También se observó que las mezclas inhiben la formación de biofilm y tanto las mezclas como los extractos actúan sobre células de biofilms preformados. Las mezclas formadas por Scoparia dulcis y Ameghinoa patagonica no presentaron actividad citotóxica tanto in vitro como in vivo. Las tres mezclas mostraron actividad antifúngica in vivo en el modelo Caenorhabditis elegans. Estos resultados sientan las bases para el desarrollo de tratamientos alternativos contra C. albicans, con disminuidos efectos adversos respecto de los fármacos antifúngicos ya establecidos.Item Design and characterization of chitosan nanoformulations for the delivery of antifungal agents(MDPI, 2019-07-27) Calvo, Natalia Lorena; Sreekumar, Sruthi; Svetaz, Laura; Lamas, María Celina; Moerschbacher, Bruno M.; Leonardi, Darío