Criopreservación de Células Madre Neuronales Embrionarias (CMNEs) mediante la metodología de enfriamiento lento
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Date
2021
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Abstract
La habilidad de las células madre para actuar como fuente de nuevas
células diferenciadas y de regenerar tejidos, las hacen una herramienta
prometedora para las terapias regenerativas con la intención de restaurar los
daños producidos por una lesión aguda o enfermedad crónica. Las células
madre neurales (CMNs) son una promesa para las terapias de reparación y
regeneración debido a su ubicación única dentro del Sistema Nervioso Central
(SNC), a su potencial para proliferar y diferenciarse en todas las principales
líneas neuronales, y a su habilidad para incorporarse funcionalmente dentro de
circuitos neuronales preexistentes. Uno de los métodos más utilizados para la
preservación de dichas células es la criopreservación por enfriamiento lento. Es
necesario destacar que en los estudios publicados, se ha realizado una escasa
investigación sistemática sobre las variables criobiológicas asociadas con el
daño producido por el enfriamiento lento. Se destaca la falta de estudios
sistemáticos relacionados con variables como la velocidad de enfriamiento,
concentración y tipo del agente crioprotector (ACP), los efectos osmóticos
asociados a la introducción y remoción del ACP, la temperatura y la velocidad a
la cual se realiza este procedimiento, entre otros, faltantes que dieron la base
del desarrollo de esta Tesina.
En el presente trabajo se llevaron a cabo diversos estudios con el objeto
de contribuir al desarrollo de un protocolo de preservación de células madre
neural embrionarias (CMNEs). Para su realización, fue necesario controlar e
investigar sistemáticamente las variables asociadas al daño celular que ocurren
durante el enfriamiento lento en sistemas donde el material es congelado como
una suspensión de células aisladas. Partiendo de parámetros pre- establecidos
en nuestro laboratorio, se realizaron estudios a una dada velocidad de
enfriamiento con el objetivo de evaluar el efecto de la misma y del tiempo de
almacenamiento sobre diversos parámetros celulares como el tamaño, forma y
capacidad de proliferación.
Description
Keywords
Criopreservación, Células madres, Células madres neuronales, Enfriamiento lento, DMSO