Diseño de un termosensor bacteriano funcional en organismos eucariotas
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Date
2020
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Abstract
Todos los organismos vivos deben ser capaces de adaptarse a los cambios en la
temperatura del medio ambiente, haciendo que la percepción de este estímulo sea una
característica esencial para la supervivencia. La vía Des de Bacillus subtilis es el sistema
de percepción de frío mejor caracterizado hasta el momento y les permite a las células
adaptarse, al inducir la expresión de una desaturasa, Δ5-des. Esta respuesta está
controlada por un sistema de dos componentes (SDC) que está compuesto por una
histidina quinasa (HQ) sensora, DesK, y un regulador de respuesta (RR), DesR. En este
trabajo estudiamos el balance que existe entre los STM de DesK y el dominio de hélice
superenrollada N-terminal dinámica (2-HCC, en inglés de 2-Helix Coiled Coil), que los
conecta con el extremo citosólico catalítico. Además, caracterizamos molecularmente
SDC homólogos a DesK-DesR que son capaces de percibir bajas temperaturas. Debido al
amplio conocimiento existente y al generado en este trabajo, nos propusimos adaptar
el sistema DesK-DesR-Δ5des a células eucariotas de interés comercial y así conferirles
una ventaja adaptativa. Para ello utilizamos el hongo levaduriforme Saccharomyces
cerevisiae, y logramos el correcto funcionamiento de un promotor quimérico PDESO y del
RR adaptado a células eucariotas DesR-Y. Respecto a la HQ, conseguimos su correcto
plegamiento y ubicación en una membrana eucariota, pero no logramos que perciba
cambios de temperatura. Este trabajo significa el primer avance para la construcción de
un termosensor eucariota basado en un sistema bacteriano.
Description
Keywords
Sistemas de dos componentes, Sensor frío, Eucariontes, Células eucariotas